Articulo Evaluación de sustratos orgánicos para la producción de Trichoderma spp. Evaluation of Organic Substrates for the Production of Trichoderma spp. Carlos Enrique Sánchez - Sandoval 1 * , Fernanda Lissette Rochina - Meza 2 , Haidee Azucena Macias Rojas 3 y José Luis Quezada Montalván 4 1 Universidad Agraria del Ecuador , Guayaquil, Ecuador, 091307 , https://orcid.org/0009 - 0002 - 1435 - 016X 2 Universidad Estatal de Milagro, Facultad de Posgrados, Maestr í a en Biotecnolog í a. Milagro , Ecuador, 091050 , https://orcid.org/0009 - 0001 - 2526 - 362X fro chinam@unemi.edu.ec 3 Instituto Superior Tecnológico La Troncal, La Troncal, Ecuador, 030302 , https://orcid.org/0000 - 0003 - 1163 - 9881 , haidee35maciasr@hotmail.com 4 Universidad Nacional de Loja , L oja , Ecuador, 110101, https://orcid.org/0009 - 0006 - 2778 - 3764 , jlquezadam@unl.edu.ec * Correspondencia : cesanchez@uagraria.edu.ec https://doi.org/10.70881/hnj/v4/n4/168 Resumen: La evaluación de sustratos orgánicos permite optimiza r la reproducción masiva de hongos benéficos como los del género Trichoderma . Por tanto, el estudio tuvo como objetiv o e v alua r diferentes sustratos orgánicos para la producción de Trichoderma spp ,. Se evaluaron cinco sustratos (arroz, maíz, avena, cebada y trigo) los mismos fueron lavado s , humedeci d o s y esteriliza dos previamente en autoclave para posteriormente ser inoculados con Trichoderma spp. a concentración de 40 x 10 16 conidios/mL , las muestras se incubaron en condiciones controladas de temperatura y humedad. El experimento fue sometido a un dise ño completamente aleatorizado, se analizaron las variables concentración de conidios/mL, porcentaje de germinación y porcentaje de pureza a los ocho días mediante un análisis ANOVA y la prueba de Tukey . El arroz y el trigo resultaron ser los mejores sustratos para la mutiplicaci ó n del Trichoderma spp., alcanzando un 100% de germin ación a las 48 h oras . El arroz lideró la calidad microbiológica con 98,50% de pureza y la mayor esporulación ( c onidios/mL). En contraste, l a cebada, la a vena y el m aíz present aron el desempeño más bajo en todas las variables. En conclusion, e l arroz es el sustrato ideal para reproducir Trichoderma spp. por su alta germinación, pureza y esporulación . Palabras clave: Arroz, avena, c ultivo microbiano, hongo, maíz, m i croorganismo . Abstract: The evaluation of organic substrates makes it possible to optimize the large - scale cultivation of beneficial fungi, such as those of the genus Trichoderma . Therefore, the objective of this study was to evaluate different organic substrates for the producti on of Trichoderma spp. Five substrates (rice, corn, oats, barley, and wheat) were evaluated; they were washed, moistened, and sterilized in an autoclave prior to inoculation with Trichoderma spp. at a concentration of 40 × 10¹⁶ conidia/mL. The samples Cita: Sánchez - Sandoval , C. E., Rochina - Meza, F. L., Macias Rojas, H. A., & Quezada Montalván, J. L. (2026). Evaluación de sustratos orgánicos para la producción de Trichoderma spp. Horizo n Nexus Journal , 4 (4), 20 - 27. https://doi.org/10.70881/hnj/v4/n4 /168 Recibido: 15 / 08 /20 26 Revisado: 20 / 09 /20 26 Aceptado: 01 / 10 /20 26 Publicado: 0 6 / 10 /20 26 Copyright: © 202 6 por los autores . Este artículo es un artículo de acceso abierto distribuido bajo los términos y condiciones de la Licencia Creative Commons, Atribución - NoComercial 4.0 Internacional. ( CC BY - NC ) . ( https://creativecommons.org/lice nses/by - nc/4.0/ )
were incubated under controlled temperature and humidity conditions. The experiment followed a completely randomized design. The variables conidia concentration (conidia/mL), germination percentage, and purity percentage at eight days were analyzed using ANOVA and Tukey’s test. Rice and wheat proved to be the best substrates for the propagation of Trichoderma spp., achieving 100% germination at 48 hours. Rice led in microbiological quality with 98.50% purity and the highest sporulation (2.85×10 9 conidia/mL) . In contrast, barley, oats, and corn performed the worst across all variables. In conclusion, rice is the ideal substrate for culturing Trichoderma spp. due to its high germination rate, purity, and sporulation. Keywords: Rice, oats, microbial culture, fungus, corn, microorganism . 1. Introducción Desde hace años , la agricultura intensiva ha estado dependi en do del uso de agroquímicos para incrementar la producción d e cultivos y el co ntrol de agentes fitopatógenos (Ediagbonya et al., 2025) . A p esar de esto, se genera ta mbién graves problemas ambientales, como la desertificación del suelo, contaminación de mantos acuíferos y por tanto pérdida de la biodiversidad ecosistémica (Hossain et al., 2022) . Ante est a situación , se indaga sobre a lterna tivas sostenibles que permitan mantener la productividad sin comprometer la salud de l a biósfera . La agricultura hacia una transición ecológica, emerge el control biológico como una herramienta prometedora para sustituir el uso de pesticidas químicos (Soto - Valenzuela et al., 2026) . E n prácticas agroecológicas se aprovecha organismos antagonis tas naturales para equilibrar las poblaciones fitopatógenas (Carpio et al., 2025) . Entre l a divers idad de agentes de control biológico disponibles en el mercado, se destaca a los hongos pertenecientes al género Trichoderma , cons iderado como los más estudiados y utilizados debido a su probada eficacia y versatilidad en in situ (Rios - Catota et al., 2025) . La eficacia del Trichoderma spp. como bio producto agrícola va en función de sus múltip les mecanismos de acción, ejerciendo competencia por espacio y nutrientes con los agentes patógenos (Touray, 2026) . Este hongo es capaz de ejercer micoparasitismo directo sobre patógenos fúngicos, tiene la capacidad de secretar enzimas líticas y producir antibióticos, induci endo la respuesta de resistencia sistémica en las plantas ( Vera Rodríguez et al., 2026) . Además, posee un papel importante como promotor del crecimiento vegetal, ya que logra coloniza r las raíces optimiza ndo la absorción de nutrientes, traduciéndose en cultivos vigo rosos y tolerantes al estrés (Geng et al., 2025) . A pesar de las ventajas biológicas, la producción masiva de Trichoderma a nivel comercial enfrenta un desafío técnico y económico (de Lima et al., 2022) . El método tradicional de producción se basa e n la fermentación de sustratos s ólido s , demanda de nutri entes que garanticen el rendimiento de conidios , la viabilidad y virulencia a lo largo del tiempo ( Carranza Patiño et al., 2025 ; Encina et al., 2022) . Por l o tanto, la selección de sustrato s adecuado s es un factor determinante tener éxito en el proceso productivo. Comúnmente , se u tiliza n granos de cereales como el arroz, trigo o maíz para la producción de este hongo (Hamrouni et al., 2023) . No obstante, el uso de estos insumos no está estudiada por completo , existen limitan tes como la disponibilidad de materia prima y la preferencia del hongo por ciertos sustra tos . Esta limitación impulsa la
necesidad de evaluar fuentes alternativas de carbono que sean económicamente viables y técnicamente eficientes para la producción de Trichoderma spp. Por tales motivos, la presente investigación tiene como objetivo evalua r d iferentes sustratos orgánicos para la producción de Trichoderma spp. Este estudio permitirá tener una amplia alternativa de sustratos a utilizar al momento de multiplicar hongos del género Trichoderma que permitan una mejor viabilidad de producción de sus conidios para ser aprovechados en diferentes tipos de bioproductos. 2. Materiales y Métodos El experimento se llevó a cabo en e l laboratorio biotecnológico Bioregeneration de la ciudad de Guayaquil , Ecuador. Se evaluó una cepa de Trichoderma spp. sobre cinco sustratos como fuente de carbono para la producción de conidios . Los sustratos fueron lavados por dos ocasiones con agua destilada para eliminar impurezas, luego fueron introducidos 250 gramos en fundas de poliestireno con medidas de 30 cm de l argo por 25 cm ancho en las cuales se introdujo 20 mL de agua para general humedad a los sustratos. Todas las fundas fueron introducidas en autoclave a 125 ºC durante 15 minutos para esterilizarlos. Se prepar ar o n los inóculos a partir de Trichoderma spp. m ultiplicado en cajas Petri con agar papa dextrosa ( PDA ) , los cuales fueron diluidos con agua pectonada más agua destilada estéril en relación 1:10, toda esta mezcla fue homogeneizada en una licuadora domestica previa a la inoculación de los sustratos. Del producto de la mezcla se realizó un conteo de conidios en cámara de Neubaue r dando como resultado una concentración de 40 x 10 16 conidios/mL. Los 5 sustratos : arroz (T1), maíz, (T2) , avena (T3) , cebada (T 4 ) y trigo (T 5 ) fueron distribu idos en un diseño completamente a leatori za do , con cinco repeticiones. La unidad experimental UE estuvo con formada por una f unda plástica con sustrato inoculado . Los inóculos fueron aplicados a cada funda con sustrato a razón de 20 mL bridando ligeros movimientos para homogeneizar. Luego se dejaron bajo oscuridad a 28 ºC y 75 % de Humedad Relativa ( HR ) durante 4 días, transcurrido este tiempo se pasaron a bandejas plásticas con medidas de 45 x 65 cm controlando la HR constante a l 5 0 % durante 4 días más, y revolviendo a diario el sustrato. Durante el experimento se evaluaron las variables p orcentaje de germinación , concentración de conidios/mL, y porcentaje de pureza . Los datos obtenidos fueron analizados realizando un análisis de varianza ANOVA , identificadas las diferencias significativas entre los tratamientos se realiz ó l a prueba de medias según Tuke y con un nivel de significancia de P<0.05 . La tabulación de datos se realizó en el software estadístico InfoStat . 3. Resultados y d iscusión 3.1. P orcentaje de germinación En la t abla 1 se muestra el porcentaje de germinación de conidi o s de l hongo Trichoderma spp. evaluado en diferentes tipos de sustratos (Arroz, m aíz, a vena, c ebada y t rigo) durante tres periodos de tiempo post inoculación 24, 48 y 72 horas.
Tabla 1. Porcentaje de germinación de conidi o s de Trichoderma spp. en diferentes sustratos a lo largo del tiempo (24, 48 y 72 h oras ). Tiempo (horas) Sustratos (%) E . E . p - valor Arroz Maíz Avena Cebada Trigo 24 75,0ª 45,0 ᶜ 64,0 ᵃᵇ 60,0 ᵇ 72,0ª 48 100,0ª 65,0 ᶜ 75,0 ᵇ 78,0 ᵇ 100,0ª 72 100,0ª 80,0 ᵇ 90,0 ᵃᵇ 90,0 ᵃᵇ 100,0ª Le tras minúsculas distintas (a, b, c) en una misma fila indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de Tukey ( ) . E . E . = Error Estándar de la Media. E l resultado indica que en todos los tiempos evaluados se presentaron diferencias estadísticamente significativas (p < 0,05). Siendo el sustrato de a rroz y el Trigo los que r esultaron ser los mejores, logrando alcanza r valores más altos de germinación a las 24 h oras (75,0% y 72,0%, respe ctivamente) , a la par de logra r una germinación completa del 100,0% a las 48 h oras . Mientras tanto, s ustratos intermedios y bajos fueron l a a vena y la c ebada , mostra nd o un desarrollo intermedio con un 90,0% a las 72 h. Por otro lado, el sustrato d e m aíz fue el que presentó el menor porcentaje de germinación a lo largo de todo el ensayo, iniciando con 45,0% a las 24 h y llegando al 80,0% a las 72 h oras . Una de las practicas más comunes para la multiplic ación de Trichoderma spp. es el u so de sustratos sólidos a base de cereales ( Ceballos - Chávez et al., 2025 ) . El arroz y el trigo se caracterizan por poseer niacina (vitamina B3), esta actúa como un biocatalizador clave que acelera y potencia la multiplicaci ón del hongo Trichoderma ( Gorotiza Mena et al., 2023 ) . Estos sustratos coinciden con lo reportado por diversos autores, quienes señalan que estos granos ofrecen una perfecta relación carbono/nitrógeno, así como una porosidad y retención de humedad adecuadas para desencadenar una rápida germinación de l o s conidi o s (Jeres - Caguana et al., 2025 ; López Martínez et al., 2022 ) . Por el contrario, aquella menor tasa de germinación registrada en el sustrato de maíz podría atribuirse a su tipo de estructura pe ricárpica más dura del grano o también a la presencia de lípidos y otros compuestos de más lenta digestión enzimática, lo que retrasa la disponibilidad de nutrientes solubles en las primeras horas del desarrollo fúngico ( Colquehuanca Nina & Blanco Villacor ta 2021 ) . 3.2. C oncentración de conidios L a concentración de conidios de Trichoderma spp. evaluado según la cantidad de (conidios/mL) en diferentes sustratos sólidos, se pueden observar en la t abla 2. Tabla 2 . Evaluación de la concentración de conidios (conidios/mL) de Trichoderma spp. en diferentes sustratos sólidos . Sustrato Conidios/mL Arroz 2,85 ᵃ Trigo 1,92 ᵇ Cebada 1,24 ᶜ Avena 8,50 ᵈ Maíz 4,10 ᵉ
E.E. 0,02 p - valor D esviación Estándar ( ) . Letras minúsculas distintas (a, b, c, d, e) en una misma columna indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de rangos múltiples de Tukey ( ) . E.E. = Error Estándar. El mayor rendimiento de Trichoderma spp . se obtuvo en el sustrato de arroz con una concentración de 2,85 c onidios/mL, superando significativamente al trigo con 1,92 y a la cebada con 1,24 . L os sustratos de avena con 8,50 y el maíz 4,10 pre sentaron las concentraciones más bajas de conidi o s. Este comportamiento de superior idad en ciertos cereales se atribuye a su elevad o contenido de carbohidratos y un equilibrio apropiado de carbono y nitrógeno, lo cual estimula la esp orulación asexual del hongo. Esta tendencia concuerda con e l report e previo de Lopez Orellana et al., ( 2026 ) , quienes al evaluar la esporulación de Trichoderma spp., identificaron que e l sustrato con mayor contenido de almidón y porosidad física como el arroz favorece de manera representativa la biomasa conidial. 3.3. Porcentaje de pureza A continuación, se muestra en la tabla 3 el porcentaje de pureza de l crecimiento del hongo Trichoderma spp. en diferentes sustratos sólidos . Tabla 3 . P orcentaje de pureza del crecimiento de Trichoderma spp. en diferentes sustratos sólidos . Sustrato Porcentaje de pureza (%) Arroz 98,50 0,15ᵃ Trigo 95,20 0,16 ᵇ Cebada 91,00 0,14 ᶜ Avena 86,40 0,13 ᵈ Maíz 81,80 0,15ᵉ E.E. 0,15 p - valor D esviación Estándar ( ) . Letras minúsculas distintas (a, b, c, d, e) en una misma columna indican diferencias estadísticamente significativas según la prueba de rangos múltiples de Tukey ( ) . E.E. = Error Estándar. El sustrato de arroz presentó el mayor porcentaje de pureza del Trichoderma spp . alcanzando un 98,50%, seguido por el trigo con 95,20%, la cebada 91,00%, la avena 86,40% y el maíz 81,80%. Este rendimiento concuerda con lo señalado por la literatura publicada , quienes destacan que la forma física del grano de arroz cocido provee una perfecta aireación interna adecuada y un equilibri o de carbohidratos de fácil asimilación, lo que favore ce una mayor esporulación aerobia (Casilla & Crespo Melgar 2026 ) . Por el contrario, el maíz y la avena tienden a apelmazarse con la humedad, lo que impide la transferencia de oxígeno en la fermentación en estado sólido ( Calvache et al., 2026 ) . Bajo este precepto se consolidó al sustrato de arroz como el medio óptimo para la multiplicación m asiva de Trichoderma spp., alcanzando una mayor pureza microbiológica , así como la más alta densidad conidial.
4 . Conclusiones El arroz resulto ser e l mejor sustrato para la germinación de conidios de del hongo Trichoderma spp., alcanzando diferencias estadísticamente significativas con un 75,0 0 % a las 24 horas, y alcanzando una completa germinación d el 100, 0 0 % a las 48 horas . De igual manera, e l sustrato de arroz fue el que alcanzó el mayor rendimiento con con idios/m L . Finalmente, con respecto a la pureza del hongo, e l sustrato de arroz se consolidó como el medio sólido óptimo para la multiplicación masiva del Trichoderma spp., al registrar el 98,50 % de pureza micro biológica en comparación con los sustratos de menor rendimiento. Se atribuye que los resultados alcanzados se deban a la porosidad física que forma el grano del arroz que por su forma permite una mejor aireación entre sus espacios , además su aporte de cont enido de almidón brinda u n mejor equilibrio de carbohidratos al hongo en la hora de su activación, desarrollo y esporulación . Contribución de los autores : Conceptualización, SSCE ; metodología, SSCE ; análisis formal, R MFL ; investigación, SSCE ; redacción del borrador original, SSCE y MRHA ; redacción, revisión y edición, QMJL ; supervisión, QMJL . Todos los autores han leído y aceptado la versión del manuscrito. Financiamiento: Esta investigación no recibió financiación externa. Conflicto de inter eses: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses. Declaración de disponibilidad de datos: Los datos están disponibles previa solicitud a los autores de correspondencia: cesanchez@uagraria.edu.ec Referencias Bibliográficas Calvache, O. L. B., Bedoya, Ó. A., Mora, O. O., Paredes, K. D., & Arévalo, R. T. (2026). Evaluación sensorial, bromatológica y microbiológica de sopa deshidratada de champiñón ostra (Pleurotus ostreatus) cultivado en residuos de maíz y trigo. TecnoLógicas, 29(66), e3688 - e3688. https://doi.org/10.22430/22565337.3688 Carpio, M., Vera, J., Yugsan, F., Gavin, C., & Barzallo, D. (2025). Biofertilizer enriched with Paenibacillus polymyxa and Trichoderma sp. for radish cultivation. Revista Caatinga, 38, e13759 – e13759. https://doi.org/10.1590/1983 - 21252025v3813759rc Carranza Patiño, M. S., Rivera Castillo, V. C., Marín Cuevas, C. V., Torres Rodríguez, J. A., & Cedeño Moreira, A. V. (2025). Trichoderma spp. en la propagación sostenible de Theobroma cacao L. bajo distintos sustratos. Multidisciplinary Collaborative Journal, 3(2), 92 - 113. https://doi.org/10.70881/mcj/v3/n2/52 Casilla, S. W., & Crespo Melgar, C. (2026). Valorización de residuos agrícolas para producción de esporas de Trichoderma mediante fermentación en estado sólido. CIBUM SCIENTIA, 5(1), 26 - 38. https://doi.org/10.53287/pisv7978xx72f Ceballo s - Chávez, Ángel R. ., López - Valenzuela, B. E. ., Valenzuela - Escoboza, F. A. ., López - Bautista, E. ., Marquez - Lujan, H. A. ., & Chávez - García, L. E. . (2025). Reproducción conidial de Trichoderma asperelloides en medios de cultivo y
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